Tehnik kultur jaringan

PERBANYAK BIBIT PISANG SECARA KULTUR JARINGAN



PENDAHULUAN
Teknik Kultur Jaringan adalah mengisolasi bagian tanaman seperti daun, mata tunas serta menumbuhkan bagian-bagian tersebut dalam media buatan secara aseptik yang kaya nutrisi dan zat pengatur tumbuh dalam wadah tertutup yang tembus cahaya sehingga bagian tanaman dapat memperbanyak diri dan bergenerasi menjadi tanaman lengkap
Keuntungan Kultur Jaringan adalah :· Menghasilkan bibit dalam jumlah banyak, bermutu, seragam dalam waktu singkat· Sifat tanaman sama dengan induknya· Kesehatan bibit lebih terjamin· Kecepatan tumbuh lebih cepat dibanding konvensional
Langkah-langkah dalam proses Kultur Jaringan meliputi :· Pembuatan media· Inisiasi· Sterilisasi· Multiplikasi· Pengakaran· Aklimatisasi
MediaMerupakan faktor penentu dalam perbanyak secara Kultur Jaringan.Komposisi Media (MS) dalam Kultur Jaringan pisang adalah sebagai berikut :
Garam Mineral mg/lNH4N03 1650KN03 1900CaCl2.2H20 440MgS04.7H20 370KH2P04 170FeS04.7H20 27,8Na2EDTA 37,3MnS04.4H20 22,3ZnS04.7H20 8,6H3B03 6,2KI 0,83Na2Mo04.2H20 0,25CuS04.5H20 0,025CoC12.6H20 0,025
Vitamin mg/lMyo-inositol 100Pyridoxine 0,5Niacine 0,5Thiamine 0,1Glycine 2,0
Hormon mg/lBAP 5-10NAA 0,1-0,5
Bahan tambahan : Gula 30 g/l, air kelapa 150 ml/l, agar 6,2 g/l, pH 5,6-5,8
InisiasiInisiasi adalah pengambilan eksplan dari bagian tanaman yang akan di Kultur· Anakan· Cuci dengan air mengalir· Dikecilkan dengan pisau· Dimasukan dalam media
Sterilisasi· Sterilisasi luar :Eksplan direndam dalam larutan Agrimycine 2 mg/l dan Benlate 2 mg/l selama 1 -24 jam· Sterilisasi dalam Laminar Air Flow§ Rendam eksplan dalam larutan clorox 30% selama 15 menit§ Bilas 2 x dengan air steril§ Kupas 1-2 pelepah§ Rendam dalam larutan clorox 15% selama 10 menit§ Bilas 2x dengan air steril§ Kupas 1-2 pelepah§ Kupas sampai sisa 3 daun pelepah ukuran 1,5 x 1,5 cm§ Celup dalam larutan clorox 1% dan tanam di media
Lama waktu inisiasi dalam kondisi normal adala 4 minggu (minimal telah 2 x subkultur), selanjutnya masuk tahap multiplikasi
MultiplikasiMultiplikasi adalah kegiatan pemotongan dan pemindahan eksplan ke media baru
PengakaranHasil multiplikasi selanjutnya dipindah dalam media pengakaran sehingga terbentuk tanaman yang sempurna (planlet)Media pengakaran adalah MS + 5 ppm NAA + Charcoal 1 g/l
AklimatisasiAklimatisasi adalah proses penyesuaian palnlet dari kondisi mikro dalam botol (heterotrof) ke kondisi lingkungan luar (autotrof)
Pemilihan KulturBotol kultur dipelihara dalam ruang kultur aseptik (steril) dengan suhu 18-25 C dan intensitas cahaya 3000 - 10.000 lux selama 16 jam/hari